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      ATCC原代細胞使用的注意事項,大家可以來本文看看

      更新時間:2022-09-21 點擊量:1314
        ATCC原代細胞使用的注意事項如下:
        1、請先檢查是否有漏液或者污染情況,若發(fā)現(xiàn)漏液或者污染,請拍照發(fā)給我們,我們核實后會進行退換。
        2、請先放置于顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài),撕去封口膜并將瓶子置于37℃培養(yǎng)約2-3個小時。
        3、棄去瓶中的培養(yǎng)基,添加附帶的*培養(yǎng)基。
        4、如果細胞長滿到90%以上,就要及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用附帶的*培養(yǎng)基。
        ATCC原代細胞凍存過后的復蘇和培養(yǎng):
        1、先準備好細胞培養(yǎng)皿或細胞培養(yǎng)瓶,及產(chǎn)品說明推薦的相應細胞培養(yǎng)基。并在37℃水浴中預先溫熱細胞培養(yǎng)基。
        2、小心取出裝有細胞的凍存管,保持管蓋擰緊,將凍存管蓋以下的部分置于37℃水浴中并輕微的攪拌以幫助解凍。解凍過程應該盡快,大約短于兩分鐘或待后一塊小冰晶體剛?cè)诨?,就應將細胞凍存管取出水浴?/div>
        3、在水浴中取出的細胞凍存管表面噴灑70%乙醇配制的消毒劑,用無菌紙巾或紗布拭干。之后的操作步驟都應該遵循在無菌條件下生物安全柜中嚴格操作。
        4、小心擰開凍存管的頂部,將管內(nèi)容物用1ml移液槍轉(zhuǎn)移到含9毫升培養(yǎng)基的無菌離心管中。離心5到7分鐘(125xg),小心吸去上清液以去除抗凍劑(二甲基亞砜),避免丟失細胞沉淀。將細胞沉淀重懸于配好的*培養(yǎng)基中。將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)容器,輕輕搖晃使細胞均勻的分布。生長較慢的細胞株可重懸于5-8ml培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到T25培養(yǎng)瓶。生長較快的細胞株可重懸于12-20ml培養(yǎng)基并轉(zhuǎn)移到T75培養(yǎng)瓶。
        5、將細胞培養(yǎng)容器置于細胞培養(yǎng)箱,在溫度37℃,二氧化碳濃度5%的培養(yǎng)條件下進行孵育。細胞培養(yǎng)24小時后應在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長狀況。
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