RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)總結(jié)

RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)總結(jié)
基本情況: 小鼠來源白血病毒誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞，屬于巨噬細(xì)胞，貼壁生長。

形態(tài)以類圓形和不規(guī)則為主，一般1～2個(gè)核，極少數(shù)有3個(gè)核，胞漿伸展時(shí)胞體較大。鏡下細(xì)胞為小珍珠似的圓形橢圓形。

2，培養(yǎng)情況

培養(yǎng)條件：10%FBS高糖DMEN，進(jìn)口gibco血清更好

傳代：細(xì)胞增殖較快，70%即可傳代，細(xì)胞有觸角也提示需要傳代，1：3----1:6傳代，推薦使用皿。傳代時(shí)切記不要使用*，正常情況下此細(xì)胞貼壁不牢，直接吹打即可，*消化會使細(xì)胞伸出觸角改變形態(tài)。我是直接用培養(yǎng)基吹打，也可以用PBS，感覺無差異。

凍存和復(fù)蘇：和普通細(xì)胞無異。

RAW264.7作為巨噬細(xì)胞有很強(qiáng)的吞噬能力，吞噬抗原后伸出長角，就是大家常見的偽足。同時(shí)貼壁黏附能力增強(qiáng)，傳代時(shí)難以消化下來。

   該細(xì)胞貼壁時(shí)間短，成片生長，似小菌落般小片生

長，zui后連,成一片并會疊層。傳代密度不易過高或者過低，過低會導(dǎo)致細(xì)胞生長緩慢甚至不生長，過高，細(xì)胞會長出偽足。

3， 關(guān)于RAW264.7分化，

正常細(xì)胞為貼壁不牢的圓形橢圓形細(xì)胞，分化后伸出偽足，貼壁能力增強(qiáng)。

避免方法，

1， 血清是進(jìn)口的真血清

2， 密度不要太高或者太低，由其是需要傳代時(shí)切不可拖延時(shí)間

3， 傳代時(shí)切不可*消化，直接吹打就能下來

4， 不要污染，包括其他細(xì)胞株的污染