探針法熒光定量PCR試劑盒中qPCR探針法采用的幾種方式

　　探針法熒光定量PCR試劑盒是使用探針法進(jìn)行qPCR實(shí)驗(yàn)的 即用型優(yōu)化預(yù)混液。兼容所有的qPCR檢測儀器,多種模板。探針法熒光定量PCR試劑盒使用時(shí)僅需加入模板、探針和引物即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。反應(yīng)管中的熒光強(qiáng)度也是探針法檢測PCR產(chǎn)物量的依據(jù)。
 

　　探針法熒光定量PCR試劑盒qPCR探針法的幾種方式：
 

　　1、Taq-Man探針：Taq-Man探針法是經(jīng)典的探針方法。
 

　　2、雙雜交探針：與Taq-Man法不同，雙雜交探針的供體基團(tuán)和受體基團(tuán)分別在兩條探針上，這兩條探針都可以與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交，雜交位置不同但很接近，反應(yīng)時(shí)兩條探針一頭一尾雜交于擴(kuò)增產(chǎn)物上，雜交后兩個(gè)基團(tuán)距離在10nm以內(nèi)，此時(shí)產(chǎn)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象，激發(fā)光下供體基團(tuán)不發(fā)光，受體基團(tuán)發(fā)光，檢測受體基團(tuán)的發(fā)光情況既可以確認(rèn)擴(kuò)增產(chǎn)物的情況。
 

　　3、分子信標(biāo)探針：分子信標(biāo)探針采用的是在反應(yīng)中增加熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)距離的方法，和Taq-Man法不同，分子信標(biāo)探針不是采用酶切的方式使熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)分離，而是通過雜交的方式改變探針二級結(jié)構(gòu)，增加兩個(gè)基團(tuán)的距離從而使熒光基團(tuán)發(fā)光。
 

　　4、蝎形探針：蝎形探針又叫蝎形引物，因形狀類似蝎子而得名，其基本原理與分子信標(biāo)探針十分類似，不同點(diǎn)在于，蝎形探針3’端帶了PCR引物，反應(yīng)中得到的產(chǎn)物與蝎形探針為一個(gè)分子，探針的雜交在分子內(nèi)部，而不需要兩個(gè)分子參與，從而使雜交反應(yīng)更加迅速，高效。